丙泊酚是已經(jīng)應(yīng)用于臨床近30年的靜脈麻醉藥，擁有良好的理化性質(zhì)及藥效學(xué)、藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)，表現(xiàn)為誘導(dǎo)起效快、蘇醒迅速 。丙泊酚在臨床麻醉誘導(dǎo)、維持，ICU患者鎮(zhèn)靜，門診手術(shù)或無痛胃腸鏡等方面有著廣泛的應(yīng)用。麻醉中輸注丙泊酚后，其作用強(qiáng)度與其在體內(nèi)的分布和濃度有關(guān)，受多種因素影響，如性別、年齡、體重、伴發(fā)疾病等 ，用藥個(gè)體差異較大。在丙泊酚輸注過程中不適當(dāng)?shù)挠昧繒?huì)帶來不良后果 ，這使得丙泊酚的臨床應(yīng)用存在安全隱患。此外，隨著全憑靜脈麻醉技術(shù)的臨床應(yīng)用，促進(jìn)了靶控輸注（target controlled infusion, TCI）的發(fā)展，對(duì)于閉環(huán)TCI的應(yīng)用需求日益凸顯。閉環(huán)TCI需要對(duì)血藥濃度有著精準(zhǔn)實(shí)時(shí)的反饋才能完成對(duì)麻醉深度的調(diào)節(jié)，進(jìn)而確保麻醉效果及對(duì)麻醉預(yù)后的評(píng)價(jià)。如何對(duì)靜脈麻醉藥的血藥濃度進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)成為了制約靜脈麻醉發(fā)展的瓶頸。因此，為達(dá)成精準(zhǔn)麻醉的目標(biāo)，進(jìn)行個(gè)體化用藥，麻醉中對(duì)丙泊酚血藥濃度的監(jiān)測(cè)至關(guān)重要，現(xiàn)就丙泊酚血藥濃度的監(jiān)測(cè)技術(shù)及研究進(jìn)展予以綜述。

色譜法又稱“色譜分析法”“層析法”，是利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)有選擇性分配的性質(zhì)，以流動(dòng)相對(duì)固定相中的混合物進(jìn)行洗脫，被分析的混合物中不同物質(zhì)會(huì)以不同的速度沿固定相移動(dòng)，最終達(dá)到將混合物分離的效果 。該方法不僅在有機(jī)化學(xué)、分析化學(xué)以及生物化學(xué)等領(lǐng)域有著極其廣泛的應(yīng)用，而且在臨床上有著適用性好、選擇性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)，可以與其他檢測(cè)或者分離方法聯(lián)合應(yīng)用，以提高檢測(cè)效率。

1.1　高效液相色譜法（high performance liquid chromatography, HPLC）

HPLC是色譜法的一個(gè)重要分支，流動(dòng)相為液體，具有不同極性的溶劑或者緩沖液、混合溶劑等組成的流動(dòng)相皆以高壓輸液系統(tǒng)泵入裝有直徑不同的填料色譜柱即固定相，各種組分在色譜柱內(nèi)被分離后，繼續(xù)進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，最終實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本的檢測(cè)分析。根據(jù)其固定相和流動(dòng)相極性的不同，分為正向高效液相色譜和反相高效液相色譜。由使用極性的固定相和弱極性的流動(dòng)相所共同組成的液相色譜體系稱為正向高效液相色譜，對(duì)于使用非極性的固定相和極性的流動(dòng)相所組成的液相色譜體系則稱為反相高效液相色譜。Adam等 于1981年首次使用HPLC測(cè)得血中丙泊酚濃度以來，許多學(xué)者為了更好地對(duì)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)分離，嘗試了多種不同的物質(zhì)作為固定相和流動(dòng)相對(duì)物質(zhì)進(jìn)行分離。張惠君等 使用反相液相色譜測(cè)定了人血漿中的丙泊酚血藥濃度。

流動(dòng)相經(jīng)色譜柱洗脫后的洗脫液需經(jīng)檢測(cè)器檢測(cè)，作用是把洗脫液中組分的量轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)，按其原理可分為光學(xué)、熱學(xué)、電化學(xué)、電學(xué)、放射性、氫火焰離子化檢測(cè)器。對(duì)于丙泊酚血藥濃度的檢測(cè)，臨床上常用的是兩種光學(xué)檢測(cè)器——紫外檢測(cè)器和熒光檢測(cè)器。選擇不同的檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)會(huì)影響最后的測(cè)定結(jié)果。因丙泊酚本身結(jié)構(gòu)性質(zhì)存在苯酚結(jié)構(gòu)的母核，具有較強(qiáng)的紫外吸收和熒光吸收性質(zhì)，在相關(guān)實(shí)驗(yàn)中對(duì)比紫外法和熒光法后發(fā)現(xiàn)，熒光法較紫外法靈敏度更高，其血漿中的內(nèi)源性雜質(zhì)干擾小，基線較為平穩(wěn)，具有更低的檢測(cè)限 。現(xiàn)將有關(guān)HPLC分析丙泊酚血藥濃度的方法匯總?cè)绫?。

HPLC作為臨床經(jīng)典的藥物濃度檢測(cè)方法是一種類似于“金標(biāo)準(zhǔn)”的存在，但其預(yù)處理步驟繁瑣、檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，限制了臨床應(yīng)用的發(fā)展，特別是實(shí)時(shí)在線檢測(cè)藥物濃度方面。

1.2　超高效液相色譜法（ultra?performance liquid chromatography, UPLC）

色譜理論認(rèn)為如要提高色譜儀器的解析度，需要提高色譜柱的效能，根據(jù)第姆特方程可知，如使用粒徑小于2 μm的小顆粒填料進(jìn)行填柱是極佳的辦法 。顆粒度變小后，則柱長(zhǎng)可按比例進(jìn)行縮短，但柱效可保持不變，因顆粒度減小其最佳流速也將變大，由此，可以通過提高流速進(jìn)一步加快物質(zhì)的分離速度。UPLC的基本原理與HPLC相同，不同點(diǎn)是UPLC的色譜柱采用小顆粒填料，并配有高壓溶劑輸送系統(tǒng)，與HPLC相比擁有更強(qiáng)的分離能力和更高的柱效，提高了檢測(cè)速度及靈敏度 。譚璐等 使用UPLC建立了測(cè)定重癥腦損傷患者血漿中丙泊酚濃度的方法（表2），但是受制于其設(shè)備昂貴的造價(jià)，而且其半環(huán)輸注的方式以致其峰面積重復(fù)性較差，其細(xì)小的填料也對(duì)進(jìn)樣樣品有著較高的要求 ，從而限制了其應(yīng)用的發(fā)展。

色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)將色譜的分離能力與質(zhì)譜（mass spectrometer, MS）的定性能力有機(jī)地結(jié)合起來，實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜混合物更加準(zhǔn)確地定量及定性分析。同時(shí)在一定程度上簡(jiǎn)化了樣品的預(yù)處理過程。在這類儀器中，色譜后可以串聯(lián)不同的質(zhì)譜儀，根據(jù)每種質(zhì)譜儀的工作原理不同，又可分為四極桿質(zhì)譜儀、離子阱質(zhì)譜儀、飛行時(shí)間質(zhì)譜儀等。質(zhì)譜分析的原理是通過檢測(cè)被測(cè)樣品的質(zhì)核比進(jìn)行分析，分析過程中，物質(zhì)首先被離子化，按離子的質(zhì)核比分離，之后測(cè)量各種離子譜峰的強(qiáng)度來實(shí)現(xiàn)物質(zhì)分析。通過最后分析樣品的質(zhì)譜信息，可以得到樣品的定性定量結(jié)果 。目前比較常用的通用質(zhì)譜庫包括美國國家科學(xué)技術(shù)研究所的NIST庫、美國衛(wèi)生研究院的NIH庫、美國環(huán)保局的EPA庫。

2.1　液相色譜?串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)（liquid chromatography?tandem mass spectrometry, LC?MS/MS）

LC?MS/MS方法在高性能定量和鑒別檢測(cè)方面有著極高的聲譽(yù)，通過利用液相色譜強(qiáng)大的物質(zhì)分離能力與串聯(lián)的質(zhì)譜結(jié)合對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析。Dziadosz 利用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)測(cè)得了丙泊酚濃度，Alvarez等 利用LC?MS/MS同時(shí)測(cè)定血中瑞芬太尼和丙泊酚的血藥濃度，并將該方案成功應(yīng)用于3例肝移植患者。見表3。

2.2　氣相色譜?質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（gas chromatography?mass spectrometer, GC?MS）

氣相色譜是一種新的分離、分析技術(shù)，在農(nóng)業(yè)、工業(yè)等各種科學(xué)研究中都有廣泛應(yīng)用。GC?MS是一種流動(dòng)相為氣體（多為惰性氣體）的色譜法，其基本原理與前述提到的液相色譜類似，也是利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)有選擇性分配的性質(zhì)對(duì)物質(zhì)進(jìn)行洗脫，由于樣品在氣相中的傳遞速度更快，所以樣品組分在兩相之間可以以極快的速度達(dá)到平衡。另外，可以作為固定相物質(zhì)的選擇范圍較多，選擇自由度較大。氣相色譜法有分析速度快、分離效率高的優(yōu)點(diǎn)。近年來隨著高靈敏性檢測(cè)器的發(fā)展，增強(qiáng)了分析的靈敏度，又極大地?cái)U(kuò)寬了其應(yīng)用范圍 。孫英英等 應(yīng)用GC?MS測(cè)定了血液中丙泊酚的濃度。Vaiano等 對(duì)GC?MS和LC?MS/MS檢測(cè)丙泊酚的情況比較發(fā)現(xiàn)，兩者結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表4。

IMS是從20世紀(jì)60年代末發(fā)展起來的，該技術(shù)是一種在電場(chǎng)中分離分析氣相粒子的技術(shù)。在大氣壓條件下，氣相離子在外加電場(chǎng)中加速，加速過程中會(huì)與周圍的分子或離子進(jìn)行碰撞，發(fā)生反應(yīng)，在宏觀上表現(xiàn)為離子沿電場(chǎng)方向做勻速運(yùn)動(dòng)，并且離子的運(yùn)動(dòng)速度和電場(chǎng)強(qiáng)度密切相關(guān)，但離子運(yùn)動(dòng)的速度和電場(chǎng)強(qiáng)度的比值與電場(chǎng)無關(guān)，稱為離子遷移率系數(shù) ，該系數(shù)也是IMS分離分析的關(guān)鍵，IMS即通過不同離子遷移系數(shù)的差異實(shí)現(xiàn)對(duì)不同物質(zhì)的分離分析 。IMS的核心部件由兩部分組成，即電離源與漂移管，對(duì)于各種類型遷移譜的工作基本原理可以總結(jié)為：被檢測(cè)的樣品（如蒸汽或微粒）被氣化后經(jīng)半透膜濾除其中的雜質(zhì)（如煙霧、水分子等），然后被載氣攜帶進(jìn)入漂移管的反應(yīng)區(qū)內(nèi)，并被電離源電離（電離源核心多為63Ni），被測(cè)樣品被電離后形成相對(duì)應(yīng)的產(chǎn)物離子，在反應(yīng)區(qū)的電場(chǎng)作用下，電離形成的產(chǎn)物離子遵循電場(chǎng)規(guī)律向粒子門移動(dòng)，經(jīng)過粒子門形成離子脈沖，通過離子門后形成周期性的離子脈沖進(jìn)入漂移區(qū)。在漂移電場(chǎng)的作用下，電離形成的產(chǎn)物離子最終飄向收集電極。IMS具有檢測(cè)速度較快、靈敏度較高、易于實(shí)現(xiàn)在線分析檢測(cè)的特點(diǎn)。由于不同物質(zhì)產(chǎn)生的產(chǎn)物離子的淌度不同，通過整個(gè)漂移區(qū)長(zhǎng)度所用的漂移時(shí)間也不同。如已知漂移區(qū)長(zhǎng)度和漂移區(qū)內(nèi)電場(chǎng)條件下，通過測(cè)量離子從漂移區(qū)到達(dá)收集電極所用的時(shí)間，就可以計(jì)算出該離子的離子遷移率，從而可以檢測(cè)出樣品種類，其離子峰的面積，可以用于估算樣品的濃度 。如若反應(yīng)區(qū)或者漂移區(qū)的電場(chǎng)方向被改變?yōu)橹跋喾吹姆较?，IMS漂移管可以同時(shí)監(jiān)測(cè)與之前帶電極性不同的離子。

在臨床應(yīng)用中，Weston等 使用IMS技術(shù)結(jié)合解吸電噴霧電離技術(shù)及飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)對(duì)臨床幾種常用藥物進(jìn)行了測(cè)定，整個(gè)分離過程耗時(shí)短（約2 min），不需要對(duì)樣品進(jìn)行復(fù)雜的前處理或者使用色譜對(duì)樣品進(jìn)行分離，即可高選擇性地分離活性醫(yī)藥成分與其輔料。Eiceman等 利用IMS測(cè)量了3種常見的氣態(tài)麻醉劑（氟烷、安氟醚、異氟醚）。Wang等 利用IMS測(cè)量出丙泊酚的血藥濃度。此外，測(cè)量血漿藥物濃度還可以通過測(cè)量呼出氣中的丙泊酚濃度來估測(cè)，兩者有著良好的相關(guān)性。對(duì)呼出氣中的丙泊酚進(jìn)行測(cè)量有實(shí)時(shí)無創(chuàng)的優(yōu)點(diǎn)，與MS相比，IMS不需要真空系統(tǒng)，整個(gè)裝置可以設(shè)計(jì)的較小，便于攜帶，在臨床實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)方面有著巨大的潛力。

對(duì)丙泊酚血藥濃度的監(jiān)測(cè)在臨床上有著重要的意義，是個(gè)體化用藥的基礎(chǔ)，文中提到的丙泊酚血藥濃度檢測(cè)方法都有著良好的敏感性和高選擇性。與HPLC相比，UPLC與IMS分析時(shí)間極短，其中IMS與液相色譜及色譜質(zhì)譜聯(lián)用相比，因?yàn)镮MS不需要真空條件，設(shè)備體積可以做的小巧，這些特性使得IMS有著良好的臨床實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)的潛力?，F(xiàn)在臨床沒有一種標(biāo)準(zhǔn)的丙泊酚監(jiān)測(cè)方法，每一種方法都各有所長(zhǎng)，究竟哪一種更加適合，現(xiàn)在并沒有定論。因此，高效、無創(chuàng)、安全、實(shí)時(shí)易監(jiān)測(cè)的丙泊酚血藥濃度檢測(cè)方法仍需進(jìn)一步的探索與研究。